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SIM HF 培养基,专用于Hi5细胞培养

产品描述

SIM HF 培养基是专门培养High Five TM细胞的无蛋白无血清添加培养基。

SIM HF 培养基仅供实验研究、工业生产,不可用于人体及动物。

产品特点
昆虫细胞专用培养基 即用型完全培养基 培养基批次间性能稳定
上千蛋白表达成功案例 同类产品性能更优越 SIM HF 适用于细胞增殖、蛋白表达
产品参数
外观 淡黄色澄清溶液 适用细胞株 BTI-TN-5B1-4 (High FiveTM)
渗透压 340-400 mOsm/kg 细胞接种密度 0.3-0.6×106 cells/mL
pH值 6.0–6.5 倍增时间 < 26 hrs
无菌检测 无菌 最大细胞密度 >6×106 cells/mL
储存 2-8℃,避光 细胞培养评价 优良
推荐使用时间 见瓶签 病毒感染复数
(MOI)
0.5-2.5

SIM HF 培养基为澄清淡黄色透明液体,2~8℃避光保存,如发现培养基变得浑浊或出现沉淀,请勿使用。

产品使用效果
细胞密度高
义翘神州的SIM HF培养基在昆虫细胞BTI-TN-5B1-4 (High FiveTM)的培养上更具优势。
SIM HF培养基细胞生长密度

图1.细胞生长密度检测 Hi5细胞在SIM HF养基中的活细胞密度随培养时间的变化。

产品使用方法

细胞培养、传代

将细胞接种到摇瓶、大培养三角瓶或生物反应器中,细胞培养体积勿超过摇瓶体积的1/3;

培养条件为27±1 ℃,摇床转速为150 rpm(不同摇床转速可能有差异,如细胞生长不好,请摸索最佳转速,刚复苏的细胞建议使用较低转速进行适应性培养);

当细胞密度生长达到2~3×106 cells/mL时,可以进行传代。

用新鲜的培养基将细胞稀释至合适密度( 0.3-0.6×106 cells/mL ),接种至合适的容器中。

细胞冻存

选择处于对数生长期的细胞,保证活率大于90%;

制备细胞冻存液:45% 新鲜培养基,45% 条件培养基, 10% 二甲基亚砜溶液(DMSO) ;

200 g离心5 分钟,弃去上清;

用细胞冻存液重悬细胞, 取样计数,调整细胞密度;

迅速分装细胞至无菌的冻存管中,每管1~2 mL,密封;

将冻存管放入程序降温盒中,-70 ℃冰箱放置过夜; 如需要长期保存,在液氮罐中保存。

细胞复苏

将冻存管迅速转移至27℃水浴中,进行融化。

将融化的细胞转至无菌的含5-10ml新鲜培养基的无菌离心管中。

200g低速离心5分钟,缓慢倒掉上部培养基,不要将沉降的细胞悬起。

用15-20ml新鲜培养基重悬细胞,确保重悬后的细胞密度为0.6×106/ml左右。

将重悬的细胞放入无菌培养瓶中,旋盖拧松,放在摇床中悬浮培养。

当细胞密度生长达到2~3×106/ml时,可以进行传代,传代密度为0.4-0.5×106/ml。

已发表的文献

Dong Deng, Chao Xu, Pengcheng Sun. et al. Crystal structure of the human glucose transporter GLUT1. Nature. 2014 May 18. doi: 10.1038/nature13306.

  • Crystal structure of the human glucose transporter GLUT1
    Author
    Deng, D;Xu, C;Sun, P;Wu, J;Yan, C;Hu, M;Yan, N;
    Year
    2014
    Journal
    Nature
    Application
    culture
  • Structural basis of N6-adenosine methylation by the METTL3–METTL14 complex
    Author
    Wang, X;Feng, J;Xue, Y;Guan, Z;Zhang, D;Liu, Z;
    Year
    2016
    Journal
    Nature
    Application
    cell culture
  • Crystal structures of the extracellular domains of the CrRLK1L receptor-like kinases ANXUR1 and ANXUR2
    Author
    Du, S;Qu, LJ;Xiao, J;
    Year
    2018
    Journal
    Protein Sci.
    Application
    culture
  • Crystallization and Structural Determination of the Human Glucose Transporters GLUT1 and GLUT3
    Author
    Deng, D;Yan, N;
    Year
    2018
    Journal
    Methods Mol. Biol.
    Application
    cell culture
  • Structure and evolution of the Fam20 kinases
    Author
    Zhang, H;Zhu, Q;Cui, J;Wang, Y;Chen, MJ;Guo, X;Tagliabracci, VS;Dixon, JE;Xiao, J;
    Year
    2018
    Journal
    Nat Commun
    Application
    culture
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